Essai n° 442E: Sensibilisation cutanée in vitro
Essai de sensibilisation cutanée in vitro portant sur l'événement clé relatif à l'activation
des cellules dendritiques dans la voie toxicologique impliquée dans les effets indésirables
pour la sensibilisation cutanée
La présente Ligne directrice (LD) pour les essais de produits chimiques fondée sur
les événements clés porte sur le danger de sensibilisation cutanée pour la santé humaine
faisant suite à une exposition avec un produit chimique. Elle porte plus particulièrement
sur l’activation des cellules dendritiques, qui est un événement clé de la voie toxicologique
impliquée dans les effets indésirables (AOP) pour la sensibilisation cutanée. La sensibilisation
cutanée se réfère à une réponse allergique faisant suite à un contact avec la peau,
selon la définition du Système général harmonisé de classification et d'étiquetage
des produits chimiques (SGH) des Nations Unies.
La présente LD décrit trois méthodes in vitro portant sur le même événement clé :
(i) le test d’activation de la lignée cellulaire humaine (h-CLAT), (ii) le test d’activation
de la lignée cellulaire U937 (U-SENS) et (iii) l’essai par gène rapporteur de l’interleukine 8
(essai IL‑8 Luc). Ils sont tous utilisés pour aider à distinguer les sensibilisants
des non-sensibilisants cutanés, selon le SGH. Les méthodes décrites dans la présente
LD permettent de quantifier soit les variations d’expression de marqueurs de surface
associés au processus d’activation des monocytes et des DC suite à l’exposition à
un sensibilisant (CD54 et CD86, par exemple), soit les changements d’expression de
l’IL‑8, une cytokine associée à l’activation des DC. Dans les essais h-CLAT et U-SENS,
la variation d’expression des marqueurs de surface est mesurée par cytométrie en flux
après coloration cellulaire avec des anticorps marqués par fluorochrome. Dans l’essai
IL-8 Luc, la variation d’expression de IL-8 est mesurée de façon indirecte via l’activité
du gène de la luciférase qui se trouve sous contrôle du promoteur IL-8. L’intensité
relative de fluorescence ou luminescence des cellules traitées, comparée à celle du
témoin de solvant/véhicule, est calculée et utilisée dans un modèle prédictif, pour
aider à distinguer les sensibilisants des non-sensibilisants.
Publié le July 04, 2023Également disponible en: Anglais
Dans la série:Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques, Section 4: Effets
sur la santévoir tous les titres