Essai n° 476 : Essais in vitro de mutation génique sur cellules de mammifères utilisant
les gènes Hprt et xprt
L'essai in vitro de mutation génique sur des cellules de mammifères peut être employé
pour détecter des mutations induites par les substances chimiques. Dans cet essai,
les systèmes genetiques utilisés permettent de détecter une mutation sur les loci
de l’hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase (HPRT) et d’un transgène de la
xanthine-guanine phosphoribosyl transferase (XPRT). Les essais de la mutation de HPRT
et de XPRT détectent différents types d’événements génétiques.
Des cellules en suspension ou en culture monocouche sont exposées à quatre concentrations
analysables de la substance d'essai au moins, avec et sans activation métabolique,
pendant une période appropriée. Elles sont repiquées pour déterminer la cytotoxicité
et pour permettre l'expression phénotypique avant la sélection. La cytotoxicité est
habituellement déterminée en mesurant l'efficacité de clonage relative (survie) ou
la croissance totale relative des cultures après la période de traitement. Les cultures
traitées sont maintenues dans le milieu de croissance pendant une période suffisante,
caractéristique de chaque locus et de chaque type cellulaire, afin de permettre l'expression
phénotypique presque optimale des mutations induites. La fréquence de mutant est déterminée
par l’ensemencement d’un nombre connu de cellules dans le milieu contenant l'agent
sélectif pour détecter des cellules mutantes, et dans le milieu sans agent sélectif
pour déterminer l'efficacité de clonage (viabilité). Après un temps approprié d'incubation,
des colonies sont comptées.
Publié le July 29, 2016Également disponible en: Anglais
Dans la série:Lignes directrices de l'OCDE pour les essais de produits chimiques, Section 4: Effets
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